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人新布尼亞病毒(NBV)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理發(fā)表時(shí)間:2024-11-05 13:59 應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人新布尼亞病毒(NBV)表達(dá)。用純化的人新布尼亞病毒(NBV)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中新布尼亞病毒(NBV)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP 標(biāo)記的新布尼亞病毒(NBV)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),與CUTOFF 值相比較,從而判定標(biāo)本中人新布尼亞病毒(NBV)的存在與否。該實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在于其高度的特異性和敏感性,得益于精心篩選的抗體對(duì)以及優(yōu)化的反應(yīng)條件。當(dāng)樣本中存在人新布尼亞病毒(NBV)時(shí),會(huì)與固相抗體特異性結(jié)合,這一步驟確保了只有目標(biāo)病毒能夠被捕獲,大大減少了非特異性干擾。隨后,加入的HRP標(biāo)記抗體不僅進(jìn)一步驗(yàn)證了抗原-抗體結(jié)合的有效性,還通過(guò)酶促反應(yīng)放大了信號(hào),使得即使是微量病毒也能被準(zhǔn)確檢測(cè)。 顏色變化的深淺直接反映了樣本中NBV的含量:顏色越深,意味著病毒載量越高;反之,則表明病毒含量較低或不存在。通過(guò)精確測(cè)量OD值,并與預(yù)設(shè)的CUTOFF值進(jìn)行對(duì)比,研究人員能夠迅速、準(zhǔn)確地判斷測(cè)試結(jié)果,為臨床診斷和治療方案的制定提供科學(xué)依據(jù)。 此外,該Elisa試劑盒還具備操作簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、耗時(shí)短等優(yōu)勢(shì),適用于大規(guī)模篩查和疾病監(jiān)測(cè),對(duì)于控制人新布尼亞病毒相關(guān)疾病的傳播具有重要意義。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,此類試劑盒的靈敏度和準(zhǔn)確性將持續(xù)提升,為人類健康防護(hù)筑起更加堅(jiān)實(shí)的防線。 |
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