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空腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒使用方法發(fā)表時(shí)間:2024-05-20 14:48 空腸彎曲桿菌PCR檢測試劑盒使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 1. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。 2. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對照管。如果用本試劑盒自帶的 DNA 釋放劑試用裝。則按下面步驟操作: 3. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足夠 10 個(gè)樣品)為例:在一干凈塑料 管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水,充分混合均勻即可。溶液 A 工作液可室溫放置,但**在一周內(nèi)用完,不要長期放置。一次檢測一個(gè)樣品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL 工作液足夠 10 個(gè)樣品。如果待測樣品數(shù)量為其他數(shù)字, 配制的溶液 A 工作液的體積需要做相應(yīng)的調(diào)整。 4. 在標(biāo)記好的 N+2 個(gè)離心管中,加入 1-5mg 固體樣品(半粒芝麻大小,如奶酪)或5uL 液體樣品(如牛奶)待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入 5uL 陽性對照,在樣品制備陰性對照中加入 5uL 水。 5. 在每個(gè)管中加入 100 uL 溶液 A 工作液,確保固體樣品被溶液淹埋,如果是液體樣品則震蕩混勻。 6. 95℃保溫 10 分鐘。 7. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得 DNA 釋放液。每個(gè)樣品得到的 DNA釋放液足夠進(jìn)行 50-100 次 PCR。 |
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