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PCR實驗,一個看似復雜但理解后又會覺得簡單的生物技術。發(fā)表時間:2023-10-09 11:30 PCR,全稱為聚合酶鏈式反應,是一種在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術,其步驟包括高溫變性模板、引物與模板退火、引物沿模板延伸三步反應。首先,將待擴增的模板DNA置高溫下使其變性解成單鏈。這是PCR的**步,也是非常關鍵的一步,它需要將雙鏈DNA分子完全分開成單鏈。接下來是引物與模板退火,這是PCR的第二步,也是開始合成新DNA的步驟。在這個階段,人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合。這兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短。最后是引物沿模板延伸,這是PCR的第三步。在這個階段,耐熱的DNA聚合酶在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。這一步的反應不斷重復,使目的DNA得以迅速擴增。 PCR技術在科研、臨床診斷等領域有著廣泛的應用,也為我們帶來了很多便利??靵矸窒砟阒赖腜CR技術的應用吧! |
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