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人低分化鼻咽癌細胞株培養(yǎng)的操作步驟發(fā)表時間:2020-08-24 16:46 人低分化鼻咽癌細胞株培養(yǎng)的操作步驟: 1.人低分化鼻咽癌細胞株吸走用于培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞; 2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化; (細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài),導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞完全漂浮?;靹蚣毎麜r盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。) 3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細胞混勻; 4.將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng); 傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。 |
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