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丙型肝炎病毒PCR基因分型測定試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)發(fā)表時間:2020-02-24 13:31 丙型肝炎病毒PCR基因分型測定試劑盒多少錢技術(shù)概論: 聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等突出優(yōu)點(diǎn);能在一個試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項革命性創(chuàng)舉和里程碑。 產(chǎn)品特點(diǎn): 丙型肝炎病毒PCR基因分型測定試劑盒多少錢PCR引物設(shè)計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段,使其能有效地擴(kuò)增模板DNA序列。因此,引物的優(yōu)劣直接關(guān)系到PCR的特異性與成功與否。 要設(shè)計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時應(yīng)預(yù)測將要擴(kuò)增的片段單鏈?zhǔn)欠裥纬啥壗Y(jié)構(gòu)。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結(jié)構(gòu),就要避開它。如這一段不能形成二級結(jié)構(gòu),那就可以在這一區(qū)域設(shè)計引物。 現(xiàn)在可以在這一保守區(qū)域里設(shè)計一對引物。一般引物長度為15-30堿基,擴(kuò)增片段長度為100-600堿基對。 讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機(jī)。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設(shè)計的就不合理。應(yīng)重新尋找區(qū)域設(shè)計引物。 同時引物之間也不能有互補(bǔ)性,一般一對引物間不應(yīng)多于4個連續(xù)堿基的互補(bǔ)。 引物確定以后,可以對引物進(jìn)行必要的修飾,例如可以在引物的5′端加酶切位點(diǎn)序列;標(biāo)記生物素、熒光素、等,這對擴(kuò)增的特異性影響不大。但3′端絕對不能進(jìn)行任何修飾,因為引物的延伸是從3′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位,因為密碼子第3位易發(fā)生簡并,會影響擴(kuò)增的特異性與效率。 |
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